天德悦(北京)生物科技有限责任公司
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276385203@qq.com

 
Western Blot
RT-PCR
IP&Co-IP
ChIP
载体构建和蛋白表达
EMSA
样品处理
小鼠多克隆抗体制备
小鼠单克隆抗体制备
(单)双荧光素酶检测
细胞相关实验服务1
细胞相关实验服务2
CRISPR/Cas9介导基因敲除细胞系建立
ips细胞诱导,鉴定和定向分化
细胞寄送处理注意事项

 
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关于我们
公司名称:天德悦(北京)生物科技有限责任公司
公司网址:bayk9sar.com                                            Email: 276385203@qq.com            邮编:102299
公司地址:北京市昌平区科技园区振兴路36号院2号楼2层203            TEL:+8610-80117836                        

◆细胞转染,稳定细胞系建立及细胞模型

一、服务内容

1、细胞转染和稳定表达细胞株筛选

通过转染试剂或电穿孔方式等方式,将目的基因导入贴壁细胞或悬浮细胞24-48小时后,目的基因即在细胞内表达。此时为了建立稳定细胞系,可根据不同基因载体中所含的抗性标记,选用相应的药物对靶细胞进行筛选,从而得到稳定表达外源基因的细胞克隆。观察目的基因及其表达蛋白在某种细胞中的功能(短时间即可进行观察,但效应会很快丢失)。

2、针对不同种类细胞使用药物,低氧,压力等外源因素进行刺激等处理,建立相关的细胞模型,从而进行后续的研究工作。

二、样品要求(样品处理及保存见附件)

1干冰运输:取对数生长期的细胞,消化后低速离心1000rpm5min收集细胞,加入适量配制好的冻存液后吹打均匀。将细胞分装入冻存管中,标明细胞的名称、细胞代次、冻存时间及操作者;放4℃冰箱30min-2030min1h-80℃过液,然后放入液氮罐;细胞数目不少于5×106/ml

2常温运输:细胞贴壁覆盖瓶底面积达40%以上时,装满培养液,瓶口用封口膜封好,装入盒子,盒子里用泡沫或棉花塞满,让瓶子固定在盒子中。

三、服务特点

1、针对不同细胞系筛选合适的转染试剂和质粒浓度配比,提高转染效率和蛋白表达量

2、丰富的抗生素筛选经验和单细胞克隆鉴定方法提高实验效率

3、构建的稳定表达细胞株可稳定传代,极少发生性状丢失

四、收费标准

服务项目

收费标准¥

实验周期

蛋白瞬时表达或敲低

基因表达或敲低载体构建

请参见载体构建目录

2-3

质粒大提(含去内毒素)

700/质粒

1

载体转染

3000/样品

1

Western Blot检测蛋白表达或敲低

2000/目的蛋白/

2

蛋白稳定表达细胞株构建(混合克隆)

表达载体构建

请参见载体构建目录

2-3

质粒大提(含去内毒素)

700/质粒

1

转染和抗生素筛选

40000/细胞系

3-4

Western Blot检测稳定细胞株蛋白表达

2000/目的蛋白/

2

蛋白稳定表达细胞株构建(单克隆)

表达载体构建

请参见载体构建目录

2-3

质粒大提(含去内毒素)

700/质粒

1

转染和抗生素筛选

50000/细胞系

6-8

Western Blot检测稳定细胞株蛋白表达

2000/目的蛋白/

2

蛋白敲低细胞系构建(单克隆)

shRNA表达载体的构建

请参见载体构建目录

2-3

质粒大提(含去内毒素)

700/质粒

1

转染和抗生素筛选

60000/细胞系

6-8

Western Blot检测敲低细胞株蛋白表达

2000/目的蛋白/

2

蛋白真核表达(分泌表达)

分泌型表达载体的构建

请参见载体构建目录

2-3

质粒大提(含去内毒素)

700/质粒

1

细胞转染

3000/质粒

2

蛋白表达检测(Western Blot ELISA

2000/目的蛋白/膜;600/

2

蛋白表达和纯化

20000/mg

2

五、客户提供材料

1、待克隆基因和载体信息,待敲低基因信息和shRNA序列信息(如无相关shRNA序列信息,本公司可代为设计并收取相关费用);

2、待转染细胞株(如需使用常用肿瘤细胞株,如293/293THeLa等可由本公司提供);

3、阳性对照样品(尽量提供)

4、相关文献(可选)

六、提交给客户结果

1、构建完成的载体和甘油菌株;

2完整测序报告和序列碱基图

3、载体真核表达鉴定结果

4、载体真核表达蛋白

5、稳定表达细胞株>1×107

6、稳定敲低细胞株>1×107

7、完整实验报告(包括基因扩增图,细胞株过表达和敲低检测结果图等)

 

 

◆细胞功能学检测

一、服务内容

1Transwell检测

2、细胞划痕检测

3、细胞增殖/抑制曲线

4、细胞生长曲线

5、细胞凋亡检测

6、细胞活力检测

7、细胞凋亡/自噬模型

8、细胞增殖模型

9、订制细胞模型

 

二、样品要求(样品处理及保存见附件)

1、待检测细胞系及培养条件等信息(本公司可免费提供常见人和小鼠细胞系,如HeLa293T3T3等)

2、实验相关药物必须达到分析纯(特殊药物也可以使用化学纯),且来源可靠。

三、服务特点

1、可根据不同实验目的帮助客户选择最优实验方法

2、根据不同细胞系建立相关的研究模型

四、收费标准

服务项目

收费标准¥

实验周期

细胞活力检测

细胞培养

1500/细胞

待定

MTT

300/样品(三个重复)

1-2

MTS

2000/细胞/处理(三个重复)

1-2

CCK8

2000/细胞/处理(三个重复)

1-2

加入药物或其它处理后检测

请询价

2

细胞凋亡检测

Tunel法(Roche试剂盒)

500/样品(5500/试剂盒)

(含荧光显微镜拍照)

2-3

流式细胞术

600/样品(含上机费)

2-3

琼脂糖凝胶电泳检测法

300/样品

2

细胞曲线

细胞生长曲线

2000/细胞

1-2

细胞增殖/抑制曲线

3000/细胞/处理

1-2

细胞侵袭(Transwell法)和迁移检测

Transwell系统(0.4, 1.0, 3.0, 8.0 μm孔径)

8000/

2-3

Transwell系统(0.4, 1.0, 3.0, 8.0 μm孔径)

8000/

2-3

细胞划痕检测

2000/细胞/处理

2-3

细胞模型建立

细胞凋亡/自噬模型

8000/株细胞

4-6

细胞增殖模型

6000/株细胞

4-6

其它订制细胞模型

请询价

4-6

五、客户提供材料

1、待检测或处理的细胞株

2、细胞处理相关药物或特殊试剂

3、相关文献(可选)

六、提交给客户结果

1、相应的数据结果、图片和分析结果

2、建立相应模型的细胞株

3、完整实验报告

 

 

◆原代细胞分离培养

一、服务内容

1、原代细胞分离培养

2、原代干细胞培养

二、样品要求(样品处理及保存见附件)

1、干冰运输:新鲜的组织或细胞块离体后-80℃保存,并用干冰尽快送至本公司实验室;

2、实验动物运输:实验动物(如小鼠、大鼠或兔)用合适的运输笼装好后快递或送至本公司实验室;

三、服务特点

1、拥有多种原代细胞分离培养经验

2、分离培养的细胞具有很高的成活率

四、收费标准

服务项目

收费标准¥

实验周期

小鼠原代细胞系建立

40000/细胞系

3-4

大鼠原代细胞系建立

40000/细胞系

3-4

原代细胞系建立

40000/细胞系

3-4

人原代细胞系建立

60000/细胞系

3-4

特殊原代细胞系建立

请询价

4-6

原代细胞系鉴定(WBIF等)

参考相关实验目录

参考相关实验目录

原代干细胞培养

请询价

根据细胞种类待定

五、客户提供材料

1如实验动物没有特殊要求,如转基因小鼠等。本公司可负责直接从所需实验动物分离培养出所需原代细胞。

2、关于细胞培养条件的说明:本公司提供DMEM培养基,RPIM1640培养基以及G418抗生素,如需其它培养基及筛选条件,也请客户一并提供。特殊基因请客户提供相应抗体以供检测

 

六、提交给客户结果

1、分离培养的稳定原代细胞株>1×107

2.相关鉴定实验报告;

3、实验报告;

 

 

 
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