天德悦(北京)生物科技有限责任公司
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关于我们
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处理及保存(极为重要)

1、悬浮细胞样品:把细胞及培养液一起收集到15ml或者50ml离心管中,1500rpm离心3min,弃去上清;加入PBS轻轻吹打,1500rpm离心3min,弃去上清;反复3次,弃去上清后于-80度或者液氮冻存待用。在避免冻融的情况一般保存1年,建议尽快检测。
2、贴壁细胞样品:
2.1 胰酶消化:用胰酶将细胞消化后,收集到15ml或者50ml离心管中,1500rpm离心3min,弃去上清;加入PBS轻轻吹打,1500rpm离心3min,弃去上清;反复3次,弃去上清后于-80度或者液氮冻存待用。在避免冻融的情况一般保存1年,建议尽快检测。
2.2 细胞刮子收集细胞:对于某些蛋白(即对胰酶比较敏感或者实验特殊要求,如E-Cadherin不易用胰酶消化后进行WB检测),直接用细胞刮子刮下细胞,收集到EP、15ml或者50ml离心管中,1500rpm离心3min,弃去上清;加入PBS轻轻吹打,1500rpm离心3min,弃去上清;反复3次,弃去上清后于-80度或者液氮冻存待用。在避免冻融的情况一般保存1年,建议尽快检测。
3、动物组织样品:取下合适的动物或者人的组织样品后用预冷的PBS或者生理盐水漂洗,尽量除尽残留血液,用滤纸把多余PBS吸取干净。把组织分成约50mg大小(依据实验目的需要进行调整),用锡纸分别包装好或者用冻存管装好,于-80度或者液氮中保存。在避免冻融的情况一般保存1年,建议尽快检测。
4、植物样品:取得待测植物样品后,用蒸馏水把泥土漂洗干净,用滤纸把多余水分吸取干净,分装成合适大小于-80度或者液氮中保存。在避免冻融的情况一般保存1年,建议尽快检测。
5、细菌样品:细菌培养完成后,10000rpm离心5min收集细菌,加入PBS吹打,10000rpm离心5min,弃去上清;反复3次,弃去上清后于-80度或者液氮冻存待用。
6、若要检测磷酸化蛋白,请在3个月内进行。长时间保存样品容易使磷酸化蛋白去磷酸化而检测不到磷酸化条带。
7、提取胞浆、胞核蛋白的样品应尽量采用新鲜样品,冻存样品提取的胞核蛋白可能会减少。
8、血液样品(血浆中蛋白):3000rpm离心20min后收集上清,分装后于-80度或者液氮冻存待用。3个月以内检测。
9、长距离运送样品时采用干冰或者液氮。
10、样品的实际需要量请打电话咨询。


抗体保存及使用
应严格按照抗体说明书进行保存,避免出现不必要的麻烦。在-20度保存呈液体状态的抗体请不要分装。新购抗体要在2-3月以内进行WB检测等实验,以验证抗体的有效性。一般新购抗体有非特异条带等问题出现,2-3个月内没有反馈给抗体公司,抗体公司将不再受理投诉。

 
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