天德悦(北京)生物科技有限责任公司
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样品处理
小鼠多克隆抗体制备
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(单)双荧光素酶检测
细胞相关实验服务1
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CRISPR/Cas9介导基因敲除细胞系建立
ips细胞诱导,鉴定和定向分化
细胞寄送处理注意事项

 
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关于我们
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免疫沉淀及免疫共沉淀 ImmunoprecipitationIPCo-IP        服务编号:FW03

一、服务内容

1、温和条件下进行蛋白抽提,BCA定量,调整蛋白浓度

2、样品预处理:用Protein A/G Sepharose孵育(进行WB验证可以免此步骤)

3、样品与IP抗体进行孵育,之后加入Protein A/G-Agarose进行孵育

4、洗涤Protein A/G Sepharose-Antibody-Protein Complex,并对免疫复合物进行变性处理

5、沉淀产物SDSPAGE或者WB鉴定,质谱鉴定由客户自行确定

6Western blot检测

1 电泳:聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)分离蛋白样品

2 湿法转印(BLOTINGTank Transfer

3 杂交:用抗体鉴定膜上的特定蛋白(INCUBATION: Antibody

4 化学发光检测(ECL),胶片曝光

7预实验及正式实验服务

二、样品要求(样品处理及保存见附件)

1. 细胞>1×107;组织>100mg;细菌湿重1mg;植物>100mg;血清>50ul

2. 样品蛋白浓度>1mg/ml,蛋白量>200ug/样品

三、收费标准

服务项目

收费标准¥

实验周期

免疫沉淀

7500/基因

3-4

免疫共沉淀

8300/基因

3-4

四、客户提供材料

1、新鲜或正确保存的样品

2、目的蛋白一抗,空白或者阴性同种属IgG

3、阳性对照样品(尽量提供)

4、相关文献(可选)

五、提交给客户结果

1、预实验曝光结果(胶片及扫描图),预实验采取2个一抗稀释度

2、正式实验曝光结果(胶片及扫描图)

3、完整实验报告

4IOD值分析报告(可选)

六、服务说明

1待检测样品可以是待检测蛋白样品,也可以是细胞、组织等其他样品

2免疫沉淀用抗体

3、检测用抗体

4、特异性二抗

七、对照设置:由客户提供

1、空白:无抗体,只有protein A/G

2、阴性对照:无蛋白,有抗体及protein A/G

3、阴性对照:未转染细胞或者基因敲除样品

4、对应的无关空白抗体: Normal IgG

5、蛋白裂解液上清:Input

 

 

 

 
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